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　   BUNSEN本生資訊|牛血清：快問快答
   
 　  市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為幾類?

　　目前市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為四種類型：胎牛血清(FBS)、新生牛血清(NBCS)、小牛血清(CS)成牛血清(ABS)，而胎牛血清因未接觸外界所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分相對較少，含胚胎發(fā)育必須生長因子等。

　　血清名稱     縮寫      采集時(shí)間                           采集方法

　　胎牛血清     FBS       在母牛懷孕 5~8 個(gè)月          胎牛心臟密閉穿刺采血獲取的血潔

　　新生牛血清   NBCS   出生 12~24 小時(shí)未進(jìn)食新生牛 靜脈采血，亦有頸動(dòng)脈采血

　　小牛血清     CS         出生后 2 周至1年內(nèi)的小牛       靜脈取血

　　成牛血清     ABS       成牛                                      收集全血分離得

　　如何在外觀上一眼區(qū)分血清好壞?

　　淡黃色，透明——2小時(shí)以內(nèi)的國產(chǎn)新生牛血清，膽紅素含量較少;

　　金黃色，透明——產(chǎn)下較長時(shí)間的新生牛血清，一般超過2小時(shí)了;

　　金黃色，不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;

　　淡黃色，帶一點(diǎn)微紅，透明——等級最高的胎牛血清;

　　淡紅色，透明——普通的胎牛血清;

　　紅色偏深，透明——普通的胎牛血清，采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn);

　　紅色偏暗，透明——普通胎牛血清，保存不好，血紅蛋白氧化了;

　　紅色，不透明——小牛血清，透明度越差，牛齡越大。

　　正常情況下，融化后血清的外觀顏色應(yīng)該是?

　　血清為動(dòng)物來源，成分復(fù)雜，不同批次間會存在一些外觀上的差別。一般情況下，它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。

　　血清應(yīng)如何融解?

　　從冰箱中取出血清，放于2-8℃融化，融化過程中不時(shí)旋轉(zhuǎn)(swirling mix)混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用。

　　為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?

　　多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成，最常見的原因之一是融化過程中，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量?？梢?00g離心5分鐘，取上清，然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。

　　為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?

　　在2-8°C條件下存放，血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀，如血纖蛋白(fibrin)，單體時(shí)處于溶解狀態(tài)，在凍融過程中會發(fā)生聚集，形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能?？梢?00g離心5分鐘，取上清，然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象，建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱，避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時(shí)間放置。

　　如何應(yīng)對血清的批間差?

　　全球康血清產(chǎn)品通過嚴(yán)格的質(zhì)控盡可能縮小批間差，但由于血清本身的特點(diǎn)和來源，無法避免批間差?？蛻艨梢酝ㄟ^做預(yù)測試等方式，選擇可滿足要求的血清批次。

　　注：以上資料僅供參考，不同品牌產(chǎn)品可能存在設(shè)計(jì)差異，操作前建議參考說明書?。

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