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以下是植物游離氨基酸(FAA)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書摘要:
BS-5067 植物游離氨基酸(FAA)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),通過(guò)抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物與顯色底物反應(yīng),顏色深淺與樣本中FAA濃度成正比。
二、試劑盒組成
預(yù)包被酶標(biāo)板(48T/96T)
標(biāo)準(zhǔn)品(1-2管)及稀釋液(5-10mL)
酶標(biāo)檢測(cè)抗體(60-120μL)及稀釋液
顯色液A/B、終止液
濃縮洗滌液(20-30倍)
三、樣本處理
血清/血漿?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,避免溶血;
細(xì)胞上清?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒物;
組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清;
建議分裝保存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
四、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按濃度梯度稀釋(如40μmol/L→2.5μmol/L);
加樣?:
標(biāo)準(zhǔn)孔:50μL標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔:40μL稀釋液+10μL樣本(5倍稀釋);
孵育?:37℃溫育30分鐘;
洗滌?:用稀釋后的洗滌液洗板5次,每次靜置30秒;
顯色?:加顯色液A/B各50μL,37℃避光顯色15分鐘;
終止?:加50μL終止液,立即450nm測(cè)OD值。
五、注意事項(xiàng)
試劑使用前需平衡至室溫;
避免NaN3污染(抑制HRP活性);
顯色液需避光保存,終止液有腐蝕性;
不同批次試劑組分不可混用。
六、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過(guò)回歸方程計(jì)算樣本濃度。
以上資料僅供參考,如需完整說(shuō)明書,建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取最新版本。
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